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无缝克隆体系计算器

输入线性化载体与各插入片段的长度和质量浓度，自动给出反应体系中各组分的加入体积与摩尔数。

体系设置
µL
线性化载体
bp
ng/µL
插入片段

片段 1

bp
ng/µL

计算规则

  • 2× Basic Assembly Mix 固定占总体积的一半，剩余体积由载体、各插入片段与 Nuclease-free Water 共同构成。
  • 载体与片段的摩尔比按 1 : 2 计算（即每个插入片段的摩尔数 是载体的 2 倍）。
  • 推荐摩尔量随体系等比缩放：10 µL 体系为 0.01 – 0.25 pmol， 体系放大时该区间同比例放大。
  • 摩尔数由质量换算：pmol = 质量(ng) ÷ (长度(bp) × 0.65)， 其中 0.65 为每碱基对的平均分子量（kDa/bp）。